期刊简介
本刊为全国性学术技术类期刊,主要为从事肿瘤临床、防治工作的专业人员提供学术交流园地,传递国内外肿瘤外科方面的研究、发展信息。报道范围包括人体肿瘤特别是在外科领域的基础和临床研究,重点介绍专业领域内的新进展、新观点、新成果、新经验、新技术、新方法以及新药物、新器械的研制与应用。
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- 杂志名称:中国肿瘤外科杂志
- 主管单位:中华人民共和国卫生部
- 主办单位:中国医师协会 江苏省医学情报研究所 江苏省肿瘤医院
- 国际刊号:1674-4136
- 国内刊号:32-1795/R
- 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 维普收录(中)
LDR-qPCR法检测miRNA122a的表达及其与乳腺癌雌激素调控的关系
恽文;季明华;李文静;李建;钟山亮;唐金海;赵建华
关键词:荧光定量PCR, miR-122a, 乳腺癌, 雌激素
摘要:目的 建立一种新的基于连接酶依赖性反应的miR-122a实时定量PCR检测方法 (LDR-qPCR);研究乳腺癌细胞MCF-7中miR-122a的表达以及雌激素水平对其的影响.方法 以乳腺癌细胞MCF-7为样本、成熟的miR-122a为检测对象,将探针的连接反应和实时荧光定量PCR技术相结合,建立LDR-qPCR法,并开展方法 学评价以及不同(有或无激素)培养环境下miR-122a的表达分析.结果 LDR-qPCR法的扩增产物特异,经测序证实为miR-122a;LDR-qPCR法重复性好(cv<10%);检测下限为5 pg/μL总RNA,比茎环RT-qPCR法(50 pg/μL)敏感10倍.miR-122a在激素饥饿的MCF-7细胞中表达上调,约为常规培养细胞的3.65倍;经5 nmol/L雌二醇处理后又出现下调(P=0.040),但未回到常规培养细胞水平.结论 LDR-qPCR法特异、灵敏,检测范围宽;乳腺癌细胞MCF-7可表达miR-122a并受雌激素水平的调节.
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